第四章(5/7)

沒有愛的世界 全一冊

放入小型微量離心管的葉子原液,會先放入零下二十度的實驗用冷凍櫃保存。因為從播種完畢,觀察依序成長的阿拉伯芥,到開始挑選三十六株「真葉較晚冒出來,且葉片基部泛紅」的植株,還需要一段時間。按照當初的實驗設計,一旦采完三十六株的葉子,原液全部備妥後就做PCR分析。事先準備好的葉子原液,就先放在冷凍櫃中備著。

PCR儀外型很像灰色桌上型印表機。本村曾在實驗器材的商品型錄中,看過外型可愛的紅色PCR儀,但理學院B棟使用的,是徹底體現「質樸剛健」的款示。每個研究室都靠著談不上充裕的預算精打細算做實驗,除非現有的PCR儀真的壞得很徹底,否則要買新的恐怕是遙不可及的白日夢。

PCR儀上方有灰色蓋子。打開蓋子,是一排可放十二支PCR離心管的小洞。葉子原液做PCR分析時,得從小型微量離心管移到PCR離心管中,再放進PCR的孔中讓機器運作。

不過,並非只要把原液放進PCR分析就好。在那之前,必須先把混了少許酵素和少許「引子」的物質放進葉子原液。一開始就全部混合保存起來也行,只是酵素冷凍後會失去活性。因此,分成「葉子原液做好之後就先冷凍保存」和「即將要做PCR前才製作酵素與引子的混合溶液」這兩個步驟進行。

引子只要在晚間七點前向業者訂購,翌日上午就會送抵研究室。有粉狀也有透明液體狀的,總之都是裝在小型塑膠試管內。兩支一組兩千日圓左右。因為使用量很少,足以供應幾十支微量離心管的實驗上。這麼想的話實在很划算。酵素比引子貴,所以必須使用可調式微量吸管,以避免失誤浪費,並有效率地與引子混合。

引子等於是指引「應該把DNA的這裡到這裡增幅」的記號。針對想研究的基因,實驗者會選擇適當的引子向業者下訂單。

比方說本村想研究的基因D,簡寫為AHO。它的突變株d的特徵是照射到放射線後,偶然讓基因D的DNA序列某一部分整個缺失。這種偶然造成的突變株有很多,本村從中選出了她認為應該最適合這次實驗的突變株d。

引子就是用在分析DNA序列缺失,標記出「必須讓這段序列增幅」的記號。帶有葉子DNA的原液混合引子與酵素,做PCR分析後,只有含有基因D序列之處的DNA會大量增加。

如果基因沒發生突變,基因型是「DD」時,序列不會出現缺失,因此增幅的DNA片段會跑得比較長。相較之下,基因型是「dd」的突變株時,序列增幅的DNA片段就會比較短。

至於如何確認是長還是短,要用PCR溶液「電泳」的方法根據長度區分增幅出的序列長度,將DNA染色視覺化。

電泳……(內容加載失敗!請重載或更換瀏覽器)

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